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Endo S中文名是糖苷内切酶S，基因来源酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)，是一种高度特异性糖苷内切酶，可以从天然IgG重链的壳二糖核心结构之间切除N-连接糖。Endo S标记有几丁质结合域CBD，以便于从反应体系中去除。纯度在95%以上，活性高，稳定性好，无糖苷外切酶污染，无蛋白水解活性。

 

酶学性质

 

来源：微生物

分类：EC 3.2.1.96

分子量：136 kDa (SDS-PAGE)

适pH：5.5

适温度：37C

底物选择性：识别双天线复杂型N-连接糖蛋白或者糖肽。

糖蛋白水解位点：从糖蛋白糖核心结构之间切除N-连接糖。

激活剂：caCl,

储存温度：-20°C

失活条件：反应混合物在85°℃孵育10min即可失活。

 

酶活定义：

单位酶活定义为在下述条件下，10ul的反应体系中，37°C反应1小时从5 ug人源lgG中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

 

技术指标：

 

外观：无色液体（含甘油或不含甘油)

蛋白纯度：≥95%(SDS-PAGE)

比活性：≥20000 U/mL

 

应用：

糖苷内切酶S(EndoS)是一种细菌内源性β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶催化水解前两个-乙酰氨基葡萄糖之间的β-1,4键IgG Fc区域的双触角络合型N-链聚糖残基。可用于从糖蛋白中去除N-糖链。

 

实验示例：

 

1．用去离子水溶解1-20 ug的糖蛋白，加入1ul的10×GlycoBuffer 1，用去离子水定容到10 ul;

2．加入1-2ul的Endo s，轻轻吹打混匀

3. 37°℃孵育60 min;

4、用于SDS-PAGE分析或HPLC分析。

 

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