甲基化检测是用甲基基团衍生所有的羟基和N-乙酰基的方法,它可以稳定唾液酸并显著提高MALDI-MS的分析。我们已经为N-和O-聚糖开发一种高通量检测甲基化方法。该方法已可以在液相处理仪上适用,甲基化和后衍生清除都可以在此步骤进行,然后通过MALDI-MS进行分析。
从来自生物反应器的上清液单抗的研究,我们显示这种方法适合于在一天内处理数百的样品,可靠性又强,而且是跟从UHPLC获得的数据相比的。通过MALDI-MS数据采集是非常迅速的,平均一个样品只需要1分钟来处理。
下图显示了从不同的生物反应器条件下生长的单克隆抗体样本中通过这两种方法检测聚糖类(G0F,G1F和G2F)获得的相对定量的数据。该单克隆抗体由Lonza和UCL提供给我们。咨询电话:18018625233 QQ:2303607288
生物反应器的关键条件:DGS-直接气体喷射; SMS-硅胶膜喷射; S-标准培养条件; H-低温培养条件-32°C; C-温度控制条件-37°C.
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